CROMATOGRAFÍA.
La cromatografía es un método físico de separación para la caracterización de mezclas complejas, la cual tiene aplicación en todas las ramas de la ciencia. Es un conjunto de técnicas basadas en el principio de retención selectiva, cuyo objetivo es separar los distintos componentes de una mezcla, permitiendo identificar y determinar las cantidades de dichos componentes. Diferencias sutiles en el coeficiente de partición de los compuestos da como resultado una retención diferencial sobre la fase estacionaria y por tanto una separación efectiva en función de los tiempos de retención de cada componente de la mezcla.
La cromatografía puede cumplir dos funciones básicas que no se excluyen mutuamente:
- Separar los componentes de la mezcla, para obtenerlos más puros y que puedan ser usados posteriormente (etapa final de muchas síntesis).
- Medir la proporción de los componentes de la mezcla (finalidad analítica). En este caso, las cantidades de material empleadas son pequeñas.
Clasificación de los métodos de separación en cromatografía.
Las distintas técnicas cromatográficas se pueden dividir según cómo esté dispuesta la fase estacionaria:
- Cromatografía plana. La fase estacionaria se sitúa sobre una placa plana o sobre un papel. Las principales técnicas son:
- Cromatografía en columna. La fase estacionaria se sitúa dentro de una columna. Según el fluido empleado como fase móvil se distinguen:
La cromatografía de gases incluye a numerosos compuestos orgánicos. En el caso de compuestos no volátiles se recurre a procesos denominados de "derivación", a fin de convertirlos en otros compuestos que se volatilicen en las condiciones de análisis.
Dentro de la cromatografía líquida destaca la cromatografía líquida de alta resolución , que es la técnica cromatográfica más empleada en la actualidad, normalmente en su modalidad de fase reversa, en la que la fase estacionaria tiene carácter no polar, y la fase móvil posee carácter polar (generalmente agua o mezclas con elevada proporción de la misma, o de otros disolvente polares, como por ejemplo metanol). El nombre de "reversa" viene dado porque tradicionalmente la fase estacionaria estaba compuesta de sílice o alúmina, de carácter polar, y por tanto la fase móvil era un disolvente orgánico poco polar. Una serie eluotrópica es un rango de sustancias de diferentes polaridades que actúan como fase móvil y que permiten observar un mejor desplazamiento sobre una fase estacionaria.
| Tipos | Fase móvil | Fase estacionaria |
| Cromatografía en papel | Líquido | Papel de celulosa. |
| Cromatografía en capa fina | Líquido | Gel de sílice o alúmina. |
| Cromatografía de gases | Gas | Columnas capilares de sílice fundida, columnas empacadas con tierras diatomeas hechas de tubos de vidrio o metal. |
| Cromatografía líquida en fase reversa | Líquido (polar) | Empaques de siloxano de octilo o siloxano de octadecilo. |
| Cromatografía líquida en fase normal | Líquido (menos polar) | Empaques de sílice, alúmina o un soporte al que se unen químicamente grupos polares (ciano, amino, etc). |
| Cromatografía líquida de intercambio iónico | Líquido (polar) | Resinas de intercambio iónico. |
| Cromatografía líquida de exclusión | Líquido | Empaques de pequeñas partículas de sílice o polímeros con red de poros uniforme. |
| Cromatografía líquida de adsorción | Líquido | Partículas finamente divididas de sílice o de alúmina. |
| Cromatografía de fluidos supercríticos | Líquido | Columnas abiertas de sílice fundida con recubrimientos internos de varios tipos de siloxanos enlazados y de enlaces cruzados. |
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